Энэхүү судалгаа нь арилжааны үхэл, үхэлд хүргэх чанар, хоруу чанарыг үнэлэвциперметринануран хулдуудын найрлага. Цочмог сорилын үед 100-800 мкг/л-ийн концентрацийг 96 цагийн турш туршсан. Архаг шинжилгээнд байгалийн гаралтай циперметрины концентраци (1, 3, 6, 20 мкг/л) нас баралт, дараа нь микроцөмийн сорил, цусны улаан эсийн цөмийн эмгэгийг 7 хоногийн турш шалгасан. Арилжааны циперметриний бэлдмэлийн LC50 нь зулзагануудад 273.41 мкг L−1 байсан. Архаг туршилтын үед хамгийн их концентраци (20 мкг L−1) нь 50% -иас илүү үхэлд хүргэсэн бөгөөд энэ нь туршилтанд хамрагдсан бахьуудын тал хувийг устгасан. Микроцөмийн сорил нь 6 ба 20 мкг L−1-д мэдэгдэхүйц үр дүн үзүүлж, хэд хэдэн цөмийн гажиг илэрсэн нь арилжааны циперметрины найрлага нь P. gracilis-ийн эсрэг генотоксик нөлөөтэй болохыг харуулж байна. Циперметрин нь энэ зүйлийн хувьд өндөр эрсдэлтэй бөгөөд энэ нь олон асуудал үүсгэж, ойрын болон урт хугацаанд энэ экосистемийн динамик байдалд нөлөөлж болохыг харуулж байна. Иймээс циперметрины арилжааны найрлага нь P. gracilis-д хортой нөлөө үзүүлдэг гэж дүгнэж болно.
Хөдөө аж ахуйн үйл ажиллагаа тасралтгүй өргөжин тэлж, эрчимтэй ашигласны улмаасхортон шавьжтай тэмцэхарга хэмжээ авч, усны амьтад пестицидэд байнга өртдөг1,2. Газар тариалангийн талбайн ойролцоох усны нөөцийг бохирдуулж байгаа нь хоёр нутагтан зэрэг зорилтот бус организмын хөгжил, оршин тогтнолд сөргөөр нөлөөлдөг.
Хоёр нутагтан амьтад байгаль орчны матрицыг үнэлэхэд улам бүр чухал болж байна. Ануран нь амьдралын нарийн төвөгтэй мөчлөг, авгалдайн хурдацтай өсөлт, трофик байдал, нэвчдэг арьс10,11, нөхөн үржихүйн уснаас хамааралтай12, хамгаалалтгүй өндөг11,13,14 зэрэг өвөрмөц шинж чанараараа байгаль орчныг бохирдуулагч бодисын сайн биоиндикатор гэж үздэг. Уйлж буй мэлхий гэгддэг бяцхан усан мэлхий (Physalaemus gracilis) нь пестицидийн бохирдлын биоиндикатор болох нь батлагдсан4,5,6,7,15. Энэ зүйл нь Аргентин, Уругвай, Парагвай, Бразилийн байнгын ус, тусгай хамгаалалттай газар эсвэл амьдрах орчин нь өөрчлөгддөг газар нутагт байдаг1617 бөгөөд өргөн тархалттай, янз бүрийн амьдрах орчныг тэсвэрлэдэг тул IUCN ангиллаар тогтвортой гэж тооцогддог18.
Хоёр нутагтан амьтдад циперметринтэй хордсоны дараа үхлийн доорх нөлөөлөл ажиглагдсан, тухайлбал зулзагануудын зан байдал, морфологи, биохимийн өөрчлөлт23,24,25, үхэл болон метаморфозын хугацаа өөрчлөгдөх, ферментийн өөрчлөлт, ангаахайн үржлийн амжилт буурах24,25, хэт идэвхжил26, сволистерийн идэвхжил2728 дарангуйлах зэрэг өөрчлөлтүүд илэрчээ. Гэсэн хэдий ч хоёр нутагтан амьтдад циперметриний генотоксик нөлөөг судлах судалгаа хязгаарлагдмал байдаг. Тиймээс ануран төрлийн циперметринд мэдрэмтгий байдлыг үнэлэх нь чухал юм.
Орчны бохирдол нь хоёр нутагтан амьтдын хэвийн өсөлт хөгжилтөд нөлөөлдөг боловч хамгийн ноцтой сөрөг нөлөө нь пестицидийн хордлогын улмаас ДНХ-ийн генетикийн гэмтэл юм13. Цусны эсийн морфологийн шинжилгээ нь тухайн бодисын бохирдол болон зэрлэг зүйлийн хордлогын чухал биоиндикатор юм29. Бичил цөмийн сорил нь хүрээлэн буй орчны химийн бодисын генотоксик чанарыг тодорхойлох хамгийн түгээмэл аргуудын нэг юм30. Энэ нь хоёр нутагтан амьтан31,32 зэрэг организмын химийн бохирдлын сайн үзүүлэлт болох хурдан, үр дүнтэй, хямд арга бөгөөд генотоксик бохирдуулагчид33 өртөх талаар мэдээлэл өгөх боломжтой.
Энэхүү судалгааны зорилго нь бичил цөмийн сорил, экологийн эрсдлийн үнэлгээг ашиглан жижиг усны зулзагануудад арилжааны циперметриний найрлага дахь хортой нөлөөллийг үнэлэх явдал байв.
Туршилтын цочмог хугацаанд арилжааны циперметриний янз бүрийн концентрацид өртсөн P. gracilis зулзагануудын хуримтлагдсан үхэл (%).
Архаг сорилтын явцад арилжааны циперметриний янз бүрийн концентрацид өртсөн P. gracilis зулзагануудын хуримтлагдсан үхэл (%).
Ажиглагдсан өндөр нас баралт нь циперметриний янз бүрийн концентрацид (6 ба 20 мкг/л) өртсөн хоёр нутагтан амьтдад генотоксик нөлөө үзүүлсний үр дүн байсан нь эритроцитод бичил цөм (MN) болон цөмийн эмгэг байгаа нь нотлогддог. MN үүсэх нь митозын алдааг илтгэдэг бөгөөд хромосомын микротубулуудтай холбоо муутай, хромосомын шингээлт, тээвэрлэлтийг хариуцдаг уургийн цогцолборын гажиг, хромосомын тусгаарлалт, ДНХ-ийн гэмтэл засварын алдаа38,39, пестицидээс үүдэлтэй исэлдэлтийн стресс40,41 холбоотой байж болно. Үнэлэгдсэн бүх концентрацид бусад хэвийн бус байдал ажиглагдсан. Циперметрины концентраци ихсэх нь эритроцит дахь цөмийн эмгэгийг хамгийн бага (1 мкг/л) ба хамгийн их (20 мкг/л) тунгаар тус тус 5% ба 20%-иар нэмэгдүүлсэн. Жишээлбэл, тухайн зүйлийн ДНХ-ийн өөрчлөлт нь богино болон урт хугацааны оршин тогтноход ноцтой үр дагаварт хүргэж, улмаар популяцийн бууралт, нөхөн үржихүйн чадамж, цус ойртолт, удамшлын олон янз байдал алдагдах, шилжилт хөдөлгөөний хурд өөрчлөгдөхөд хүргэдэг. Эдгээр бүх хүчин зүйлүүд нь зүйлийн оршин тогтнох, арчлахад нөлөөлдөг42,43. Эритроид гажиг үүсэх нь цитокинезийн бөглөрөл байгааг илтгэж, улмаар эсийн хуваагдал үүсэх (хоёр талт эритроцитууд) 44,45; олон дэлбээтэй цөмүүд нь олон дэлбээтэй цөмийн мембраны цухуйсан хэсгүүд байдаг46, харин бусад эритроид эмгэгүүд нь цөмийн бөөр/цөмрөг47 зэрэг ДНХ-ийн олшролттой холбоотой байж болно. Цустай эритроцит байгаа нь хүчилтөрөгчийн тээвэрлэлт, ялангуяа бохирдсон усанд алдагдаж байгааг илтгэнэ48,49. Апоптоз нь эсийн үхлийг илтгэнэ50.
Бусад судалгаагаар циперметриний генотоксик нөлөөг харуулсан. Kabaña et al.51 өндөр концентрацитай циперметрин (5000 ба 10000 мкг L−1) 96 цагийн турш өртсөний дараа Odontophrynus americanus эсүүдэд хоёр цөмийн эсүүд болон апоптозын эсүүд зэрэг бичил цөм, цөмийн өөрчлөлтүүд байгааг харуулсан. Мөн P. biligonigerus52 болон Rhinella arenarum53-т циперметринээр өдөөгдсөн апоптоз илэрсэн. Эдгээр үр дүнгээс үзэхэд циперметрин нь янз бүрийн усны организмд генотоксик нөлөө үзүүлдэг ба MN болон ENA шинжилгээ нь хоёр нутагтан амьтдад үзүүлэх үхлийн үр дагаваргүй байдлын үзүүлэлт болох ба хорт бодист өртсөн уугуул төрөл зүйл болон зэрлэг популяцид хэрэглэх боломжтой болохыг харуулж байна12.
Циперметриний арилжааны найрлага нь хүрээлэн буй орчны өндөр аюул (цочмог ба архаг аль аль нь) үүсгэдэг бөгөөд төв нь АНУ-ын Байгаль орчныг хамгаалах агентлагийн (EPA) түвшнээс давсан54 бөгөөд хэрэв хүрээлэн буй орчинд байвал тухайн зүйлд сөргөөр нөлөөлж болзошгүй. Архаг эрсдлийн үнэлгээнд нас баралтын NOEC нь 3 мкг L−1 байсан нь усанд агуулагдах концентраци нь тухайн зүйлд эрсдэл учруулж болзошгүйг баталж байна55. Endosulfan болон cypermethrin-ийн холимогт өртсөн R. arenarum авгалдайн үхлийн аюултай NOEC нь 168 цагийн дараа 500 мкг L−1; энэ утга 336 цагийн дараа 0.0005 мкг L−1 болж буурсан. Зохиогчид өртөлт удаан байх тусам төрөл зүйлд хортой концентраци багасдаг болохыг харуулж байна. NOEC-ийн утга нь ижил өртөх үед P. gracilis-ийнхаас өндөр байсныг онцлон тэмдэглэх нь зүйтэй бөгөөд энэ нь циперметринтэй холбоотой зүйлийн хариу үйлдэл нь тухайн зүйлийн өвөрмөц шинж чанартай болохыг харуулж байна. Цаашилбал, нас баралтын хувьд P. gracilis-ийн CHQ утга нь циперметринтэй хордсоны дараа 64.67-д хүрсэн нь АНУ-ын Байгаль орчныг хамгаалах агентлагаас тогтоосон жишиг утгаас54, R. arenarum авгалдайн CHQ-ийн утга мөн энэ үзүүлэлтээс өндөр байна (CHQ > 3836) гэж үзжээ. шавьж устгах бодис нь хэд хэдэн хоёр нутагтан амьтдад өндөр эрсдэлтэй байдаг. P. gracilis-ийн метаморфозыг дуусгахад ойролцоогоор 30 хоног шаардлагатай56 гэж үзвэл циперметриний судлагдсан концентраци нь халдвар авсан хүмүүсийг насанд хүрэгсэд болон нөхөн үржихүйн үе шатанд бага насанд нь оруулахаас сэргийлж популяцийг бууруулахад хувь нэмэр оруулдаг гэж дүгнэж болно.
Микроцөм болон бусад эритроцитын цөмийн эмгэгийн эрсдлийн тооцоолсон үнэлгээнд CHQ-ийн утга 14.92-97.00 хооронд хэлбэлзэж байсан нь циперметрин нь байгалийн амьдрах орчинд ч P. gracilis-д генотоксик эрсдэлтэй болохыг харуулж байна. Нас баралтыг харгалзан үзэхэд P. gracilis-д тэсвэртэй ксенобиотик нэгдлүүдийн хамгийн их концентраци 4.24 мкг L−1 байна. Гэсэн хэдий ч 1 мкг/л хүртэл бага концентраци нь генотоксик нөлөө үзүүлсэн. Энэ баримт нь хэвийн бус бодгальуудын тоо57 нэмэгдэж, тэдгээрийн амьдрах орчны төрөл зүйлийн хөгжил, үржилд нөлөөлж, хоёр нутагтан амьтдын популяци буурахад хүргэж болзошгүй юм.
Шавьж устгах циперметрины арилжааны найрлага нь P. gracilis-ийн цочмог болон архаг хордлого өндөртэй болохыг харуулсан. Хордлогын нөлөөгөөр нас баралтын түвшин өндөр байгаа нь бичил цөм, эритроцитийн цөмийн эмгэг, ялангуяа шүдтэй цөм, дэлбээтэй цөм, цэврүүт цөм зэрэгт нотлогддог. Нэмж дурдахад, судлагдсан зүйлүүд нь хурц ба архаг хэлбэрээр хүрээлэн буй орчны эрсдэлийг нэмэгдүүлсэн. Эдгээр өгөгдлийг манай судалгааны бүлгийн өмнөх судалгаатай хослуулан циперметриний янз бүрийн арилжааны найрлага нь ацетилхолинэстераза (AChE) ба бутирилхолинэстеразын (BChE) үйл ажиллагаа буурч, исэлдэлтийн стресс58, усанд сэлэлтийн идэвхжил, амны хөндийн гажиг59 өөрчлөлтөд хүргэж байгааг харуулж байна. энэ зүйлийн хоруу чанар. Hartmann et al. 60 бусад есөн пестицидтэй харьцуулахад циперметриний арилжааны найрлага нь P. gracilis болон ижил төрлийн өөр зүйлд (P. cuvieri) хамгийн хортой болохыг тогтоожээ. Энэ нь байгаль орчныг хамгаалах зорилгоор циперметрины хууль ёсоор батлагдсан концентраци нь нас баралт өндөр, хүн амын урт хугацааны бууралтад хүргэж болзошгүйг харуулж байна.
Байгальд илэрсэн концентраци нь өндөр нас баралт үүсгэж, P. gracilis-д эрсдэл учруулж болзошгүй тул пестицидийн хоёр нутагтан амьтдад үзүүлэх хоруу чанарыг үнэлэхийн тулд нэмэлт судалгаа хийх шаардлагатай байна. Хоёр нутагтан амьтдын тухай судалгааг дэмжих хэрэгтэй, учир нь эдгээр организмын тухай мэдээлэл хомс, ялангуяа Бразилийн төрөл зүйлийн талаар.
Архаг хордлогын сорил нь статик нөхцөлд 168 цаг (7 хоног) үргэлжилсэн бөгөөд үхлийн доорх концентраци нь: 1, 3, 6, 20 мкг ai L−1 байв. Хоёр туршилтанд эмчилгээний бүлэг тус бүрд 10 хулсны балыг зургаан давталттайгаар үнэлж, нэг концентрацид нийт 60 хулсны балыг үнэлэв. Үүний зэрэгцээ зөвхөн усаар хийсэн эмчилгээ нь сөрөг хяналт болж байв. Туршилтын төхөөрөмж бүр нь 500 мл-ийн багтаамжтай, 50 мл уусмал тутамд 1 хулганы нягттай ариутгасан шилэн аяганаас бүрдсэн. Ууршилтаас сэргийлэхийн тулд колбыг полиэтилен хальсаар хучиж, тасралтгүй агааржуулна.
Усанд химийн шинжилгээ хийж, пестицидийн концентрацийг 0, 96, 168 цагт тогтоосон. Сабин нарын хэлснээр. 68 болон Martins et al. 69 , Санта Мариягийн Холбооны Их Сургуулийн Пестицидийн Шинжилгээний Лабораторид (LAP) хийн хроматографи болон гурвалсан квадруполь масс спектрометрийг ашиглан шинжилгээ хийсэн (Varian загвар 1200, Пало Алто, Калифорни, АНУ). Усан дахь пестицидийн тоон тодорхойлолтыг нэмэлт материал болгон үзүүлэв (Хүснэгт SM1).
Бичил цөмийн сорил (MNT) болон улаан эсийн цөмийн эмгэгийн сорил (РНХ)-ийн хувьд эмчилгээний бүлэг тус бүрээс 15 зулзаганд дүн шинжилгээ хийсэн. Могойн 5%-ийн лидокаин (50 мг г-170)-аар мэдээгүйжүүлж, цусны дээжийг нэг удаагийн гепаринжуулсан тариураар зүрхний цоолбороор цуглуулсан. Цусны т рхэцийг ариутгасан микроскопын слайд дээр бэлтгэж, агаарт хатааж, 100% метанолоор (4 0С) 2 минутын турш бэхлээд дараа нь 10% Giemsa уусмалаар 15 минутын турш харанхуйд будсан. Процессын төгсгөлд слайдыг нэрмэл усаар угааж, илүүдэл толбыг арилгаж, өрөөний температурт хатаана.
МН ба ENA байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд 71 зорилготой 100 × микроскоп ашиглан 1000-аас доошгүй улаан эритроцитуудыг шинжилсэн. Циперметрины концентраци ба хяналтыг харгалзан 75,796 улаан эритроцитыг үнэлэв. Гено хоруу чанарыг Карраско нар аргын дагуу шинжилсэн. болон Fenech et al.38,72 дараах цөмийн гэмтлийн давтамжийг тодорхойлох замаар: (1) ануклеат эсүүд: цөмгүй эсүүд; (2) апоптозын эсүүд: цөмийн хуваагдал, програмчлагдсан эсийн үхэл; (3) хоёр цөмийн эсүүд: хоёр цөмтэй эсүүд; (4) цөмийн нахиа буюу бөмбөлөг эсүүд: цөмийн мембраны жижиг цухуйсан цөмтэй эсүүд, жижиг цөмтэй ижил хэмжээтэй бөмбөлөгүүд; (5) кариолизийн эсүүд: дотоод материалгүй зөвхөн цөмийн тоймтой эсүүд; (6) ховилтой эсүүд: хэлбэр нь тодорхой хагарал эсвэл ховилтой цөмтэй эсүүд, мөн бөөр хэлбэртэй цөм гэж нэрлэгддэг; (7) дэлбээтэй эсүүд: дээр дурдсан цэврүүтүүдээс том цөм цухуйсан эсүүд; ба (8) микроэлементүүд: өтгөрүүлсэн цөм, цитоплазм багассан эсүүд. Өөрчлөлтүүдийг хяналтын сөрөг үр дүнтэй харьцуулсан.
Цочмог хордлогын шинжилгээний үр дүнг (LC50) GBasic программ хангамж болон TSK-Trimmed Spearman-Karber арга74 ашиглан шинжилсэн. Архаг туршилтын өгөгдлийг алдааны хэвийн байдал (Шапиро-Вилкс) болон дисперсийн нэгэн төрлийн (Бартлетт) зэргийг урьдчилан шалгасан. Үр дүнг нэг талын дисперсийн шинжилгээ (ANOVA) ашиглан шинжилсэн. Өгөгдлийг хооронд нь харьцуулахын тулд Tukey-ийн тестийг ашигласан бөгөөд эмчилгээний бүлэг болон сөрөг хяналтын бүлгийн хоорондох өгөгдлийг харьцуулахын тулд Даннеттын тестийг ашигласан.
LOEC болон NOEC-ийн мэдээлэлд Dunnett-ийн тестийг ашиглан дүн шинжилгээ хийсэн. Статистикийн туршилтыг Statistica 8.0 программ хангамж (StatSoft) ашиглан 95% (p<0.05) ач холбогдолтой түвшинд хийсэн.
Шуудангийн цаг: 2025-03-13