DELLA уураг нь хадгалагдсан мастер юмөсөлтийн зохицуулагчиддотоод болон хүрээлэн буй орчны дохиоллын дагуу ургамлын хөгжлийг хянах гол үүрэг гүйцэтгэдэг. DELLA нь транскрипцийн зохицуулагчийн үүрэг гүйцэтгэдэг бөгөөд GRAS домайнаараа дамжуулан транскрипцийн хүчин зүйл (TFs) болон гистон H2A-тай холбогдож зорилтот дэмжигчдэд элсүүлдэг. Сүүлийн үеийн судалгаагаар DELLA-ийн тогтвортой байдлыг хоёр механизмаар зохицуулдаг болохыг харуулж байна: фитогормон гиббереллинээр өдөөгдсөн полиубиквитинаци нь түүний хурдан задралд хүргэдэг ба хуримтлалыг нэмэгдүүлэхийн тулд жижиг ubiquitin-like modifiers (SUMO) нэгдэл. Нэмж дурдахад DELLA-ийн үйл ажиллагаа нь хоёр өөр гликозиляциар динамикаар зохицуулагддаг: DELLA-TF-ийн харилцан үйлчлэлийг O-фукозилациар сайжруулдаг боловч O-холбогдсон N-ацетилглюкозамин (O-GlcNAc) өөрчлөлтөөр дарангуйлдаг. Гэсэн хэдий ч DELLA фосфоржилтын үүрэг тодорхойгүй хэвээр байна, учир нь өмнөх судалгаагаар фосфоржилт нь DELLA-ийн задралыг дэмждэг эсвэл багасгадаг гэсэн үр дүнгээс эхлээд фосфоржилт нь түүний тогтвортой байдалд нөлөөлдөггүй болохыг харуулсан үр дүн нь хоорондоо зөрчилдсөн байна. Энд бид REPRESSOR дахь фосфоржих газруудыг тодорхойлноga1-3(RGA, AtDELLA) нь Arabidopsis thaliana-аас масс спектрометрийн шинжилгээгээр цэвэршүүлсэн ба PolyS ба PolyS/T бүс дэх RGA хоёр пептидийн фосфоржилт нь H2A-г холбож, RGA идэвхжилийг сайжруулдаг болохыг харуулж байна. RGA-ийн зорилтот дэмжигчидтэй холбоо. Фосфоржилт нь RGA-TF харилцан үйлчлэл эсвэл RGA тогтвортой байдалд нөлөөлдөггүй. Бидний судалгаагаар фосфоржилт нь DELLA-ийн үйл ажиллагааг өдөөдөг молекулын механизмыг харуулж байна.
DELLA-ийн үйл ажиллагааг зохицуулахад фосфоржилтын үүрэг ролийг тодруулахын тулд DELLA фосфоржих газрыг in vivo тодорхойлох, ургамлын функциональ шинжилгээг хийх нь чухал юм. Ургамлын хандыг цэвэршүүлсний дараа MS/MS шинжилгээ хийсний дараа бид RGA-д хэд хэдэн фосфозитыг илрүүлсэн. GA-ийн дутагдлын нөхцөлд RHA-ийн фосфоржилт нэмэгддэг боловч фосфоржилт нь түүний тогтвортой байдалд нөлөөлдөггүй. Хамгийн чухал нь RGA-ийн PolyS/T бүс дэх фосфоржилт нь түүний H2A-тай харилцан үйлчлэлцэж, зорилтот дэмжигчидтэй холбогдож, фосфоржилт нь RGA-ийн үйл ажиллагааг өдөөдөг механизмыг илчилдэг болохыг хамтран IP болон ChIP-qPCR шинжилгээгээр илрүүлсэн.
RGA нь LHR1 дэд домайн TF-тэй харилцан үйлчлэлцэх замаар хроматиныг зорилтот болгохоор элсүүлж, дараа нь PolyS/T бүс болон PFYRE дэд домайнаар дамжуулан H2A-тай холбогдож RGA-г тогтворжуулахын тулд H2A-RGA-TF цогцолборыг бүрдүүлдэг. DELLA домэйн ба GRAS домэйны хоорондох PolyS/T бүсэд Pep 2-ийг тодорхойгүй киназын фосфоржуулах нь RGA-H2A холболтыг сайжруулдаг. Rgam2A мутант уураг нь RGA фосфоржилтыг устгаж, H2A-тай холбогдоход саад болох уургийн өөр хэлбэрийг ашигладаг. Энэ нь түр зуурын TF-rgam2A харилцан үйлчлэлийг тогтворгүй болгож, зорилтот хроматинаас rgam2A-г салгахад хүргэдэг. Энэ зураг нь зөвхөн RGA зуучлалын транскрипцийн дарангуйллыг дүрсэлсэн. H2A-RGA-TF цогцолбор нь зорилтот генийн транскрипцийг дэмжиж, rgam2A-ийн дефосфоризаци нь транскрипцийг бууруулдаг болохыг эс тооцвол RGA-зуучлалын транскрипцийн идэвхжүүлэлтийн ижил төстэй загварыг тайлбарлаж болно. Хуан нараас өөрчилсөн зураг.21.
Бүх тоон мэдээлэлд Excel программ ашиглан статистик дүн шинжилгээ хийж, Оюутны t тест ашиглан мэдэгдэхүйц ялгааг тодорхойлсон. Түүврийн хэмжээг урьдчилан тодорхойлохын тулд статистикийн аргыг ашиглаагүй. Шинжилгээнд ямар ч өгөгдөл хасагдаагүй; туршилтыг санамсаргүй байдлаар хийгээгүй; Туршилтын явцад өгөгдлийн хуваарилалт, үр дүнг үнэлэхэд судлаачид сохорсонгүй. Түүврийн хэмжээг зургийн тайлбар болон эх өгөгдлийн файлд заасан болно.
Судалгааны дизайны талаар нэмэлт мэдээлэл авахыг хүсвэл энэ нийтлэлтэй холбоотой Байгалийн багцын тайлангийн хураангуйг үзнэ үү.
Масс спектрометрийн протеомикийн өгөгдлийг PXD046004 өгөгдлийн багц танигч PRIDE66 түншийн репозитороор дамжуулан ProteomeXchange консорциумд оруулсан болно. Энэхүү судалгааны явцад олж авсан бусад бүх өгөгдлийг Нэмэлт мэдээлэл, Нэмэлт мэдээллийн файлууд болон түүхий мэдээллийн файлуудад үзүүлэв. Энэ нийтлэлд зориулж эх сурвалжийн мэдээллийг өгсөн болно.
Шуудангийн цаг: 2024 оны 11-р сарын 08-ны өдөр