Ургамал ба эмгэг төрүүлэгч бодисууд
Иллинойсын Их Сургуульд (одоо Калифорниагийн Дэвис Их Сургуульд) доктор Пэт Браун сорго хувиргах популяци (SCP) гэгддэг сорго холбооны газрын зураглалын популяцийг гаргажээ. Үүнийг өмнө нь тайлбарласан бөгөөд АНУ-ын орчинд ургамлын өсөлт, хөгжлийг хөнгөвчлөхийн тулд фотопериод мэдрэмтгий бус, жижиг хэмжээтэй болгон хувиргасан олон төрлийн шугамуудын цуглуулга юм. Энэхүү судалгаанд энэ популяцийн 510 шугамыг ашигласан боловч соёололт муу болон чанарын хяналтын бусад асуудлаас шалтгаалан бүх шугамыг гурван шинж чанарын шинжилгээнд ашиглаагүй болно. Эцсийн дүнд 345 шугамын өгөгдлийг хитины хариу урвалын шинжилгээнд, 472 шугамыг flg22 хариу урвалын шинжилгээнд, 456 шугамыг TLS эсэргүүцлийн шинжилгээнд ашигласан.B. cookeiLSLP18 омгийг Арканзасын Их Сургуулийн доктор Бөрт Блумаас авсан.
MAMP хариу хэмжилт
Энэхүү судалгаанд flg22 (Genscript каталог # RP19986) болон хитин гэсэн хоёр өөр MAMP ашигласан. Хүлэмжинд хөрсөөр (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) дүүргэсэн хавтгай дээр тавьсан сорго ургамлыг ургуулсан. Ургамал цуглуулах өдөр навчны нэмэлт чийгээс зайлсхийхийн тулд дээж цуглуулахаас өмнөх өдөр ургамлыг усалсан.
Шугамуудыг санамсаргүй байдлаар сонгож, логистикийн шалтгаанаар 60 шугамаар багцлан тарьсан. Шугам бүрт гурван “саванд” суулгаж, шугам бүрт хоёр үр суулгасан. Дараагийн багцуудыг өмнөх багцыг боловсруулсны дараа бүх популяцийг үнэлэх хүртэл тарьсан. Хоёр MAMP-д хоёр туршилтын туршилт хийсэн бөгөөд хоёр туршилт тус бүрт генотипийг дахин санамсаргүй байдлаар сонгосон.
ROS шинжилгээг өмнө нь тайлбарласны дагуу хийсэн. Товчхондоо, мөр бүрт зургаан үрийг 3 өөр саванд тарьсан. Үр дүнд хүрсэн суулгацаас гурвыг нь жигд байдалд үндэслэн сонгосон. Ер бусын харагддаг эсвэл ихэнхээс нь мэдэгдэхүйц өндөр эсвэл намхан суулгацыг ашиглаагүй. 15 хоногийн настай гурван өөр сорго ургамлын 4 дэх навчны хамгийн өргөн хэсгээс 3 мм диаметртэй дөрвөн навчны дискийг гаргаж авсан. Хоёр ургамлын навч тутамд нэг диск, нэг ургамлын хоёр диск, хоёр дахь диск нь усны хяналт болсон (доор үзнэ үү). Дискнүүдийг тус тусад нь 50 µl H20 дээр хар 96 нүхтэй тавган дээр хөвүүлж, гэрэлд өртөхөөс сэргийлж хөнгөн цагаан битүүмжлэлээр битүүмжилж, өрөөний температурт хонуулсан. Маргааш өглөө нь 2 мг/мл химилюминесцент датчик L-012 (Wako, каталог # 120-04891), 2 мг/мл тунхууны пероксидаза (VI-A төрөл, Sigma-Aldrich, каталог # P6782), 100 мг/мл Хитин буюу 2 мкМ Flg22 ашиглан урвалын уусмал хийсэн. Энэхүү урвалын уусмалаас 50 мкл-ийг дөрвөн худгийн гуравт нь нэмсэн. Дөрөв дэх худаг нь MAMP-гүй урвалын уусмалыг нэмсэн туршилтын хяналт байв. Зөвхөн ус агуулсан дөрвөн хоосон худагыг мөн хавтан бүрт оруулсан.
Урвалын уусмалыг нэмсний дараа гэрэлтүүлгийг SynergyTM 2 олон илрүүлэлтийн микроплант уншигч (BioTek) ашиглан 2 минут тутамд 1 цагийн турш хэмжсэн. Плант уншигч энэ 1 цагийн турш 2 минут тутамд гэрэлтүүлгийн хэмжилт хийдэг. Худаг бүрийн утгыг гаргахын тулд бүх 31 уншилтын нийлбэрийг тооцоолсон. Генотип бүрийн MAMP хариу үйлдлийн тооцоолсон утгыг (гурван туршилтын худгийн дундаж гэрэлтүүлгийн утга - хуурамч худгийн утга) - хоосон худгийн дундаж утгыг хассан байдлаар тооцоолсон. Хоосон худгийн утга нь тэгтэй ойрхон байсан.
Навчны дискнүүдНикотиана бентамиана, чанарын хяналтын зорилгоор 96 нүхтэй хавтан бүрт хяналтын нэг өндөр хариу үйлдэлтэй соргоны шугам (SC0003) болон нэг бага хариу үйлдэлтэй соргоны шугам (PI 6069)-ийг оруулсан.
B. cookeiтарилгын бэлтгэл ба тарилга
B. cookeiӨмнө нь тайлбарласны дагуу тариалалтыг бэлтгэсэн. Товчхондоо, соргоны үрийг гурван өдрийн турш усанд дэвтээж, зайлж, 1 литрийн конус хэлбэрийн колбонд хийж, 15 psi ба 121 °C температурт нэг цагийн турш автоклавт халаана. Дараа нь үрийг шинэхэн өсгөвөрөөс гаргаж авсан 5 мл орчим мацерат мицелиар тарьсан.B. cookeiLSLP18 ялгаж аваад өрөөний температурт 2 долоо хоног байлгаж, колбыг 3 өдөр тутамд сэгсэрнэ. 2 долоо хоногийн дараа мөөгөнцөрт өртсөн соргоны үрийг агаарт хатааж, дараа нь 4°C-д талбайд тарих хүртэл хадгална. Туршилтын туршид ижил тарилгыг ашиглаж, жил бүр шинээр нь бэлтгэнэ. Тариалалтын хувьд 6-10 халдвар авсан үрийг 4-5 долоо хоногтой соргоны ургамлын үүрэнд байрлуулна. Эдгээр мөөгөнцөрөөс үүссэн спорууд нь залуу соргоны ургамалд долоо хоногийн дотор халдвар тарааж эхэлсэн.
Үрийн бэлтгэл
Тариалангийн талбайд тариалахаас өмнө соргоны үрийг ~1% Spirato 480 FS фунгицид, 4% Sebring 480 FS фунгицид, 3% Sorpro 940 ES үрийн аюулгүйн бодис агуулсан фунгицид, шавьж устгах бодис, аюулгүйн хольцоор боловсруулсан. Дараа нь үрийг 3 хоногийн турш агаарт хатаасан бөгөөд энэ нь үрийн эргэн тойронд энэ хольцоор нимгэн бүрхүүл үүсгэсэн. Аюулгүйн бодис нь гербицид Dual Magnum-ийг соёололтоос өмнөх эмчилгээ болгон ашиглах боломжийг олгосон.
Бай навчны толбоны эсэргүүцлийн үнэлгээ
SCP-г 2017 оны 6-р сарын 14-15, 2018 оны 6-р сарын 20-ны хооронд Хойд Каролина мужийн Клейтон хотын Төв Ургацын Судалгааны Станцад санамсаргүй байдлаар бүрэн блокийн загвараар тарьсан бөгөөд тохиолдол бүрт хоёр туршилтын давталт хийсэн. Туршилтыг талбай бүрт 10 үр ашиглан 0.9 м эгнээний өргөнтэй 1.8 м дан эгнээнд тарьсан. Захын нөлөөллөөс урьдчилан сэргийлэхийн тулд туршилт бүрийн захын дагуу хоёр хилийн эгнээ тарьсан. Туршилтыг 2017 оны 7-р сарын 20, 2018 оны 7-р сарын 20-нд тарьсан бөгөөд энэ үед сорго ургамал 3-р өсөлтийн шатанд байсан. Үнэлгээг нэгээс ес хүртэлх шатлалаар авсан бөгөөд өвчний шинж тэмдэггүй ургамлыг ес, бүрэн үхсэн ургамлыг нэг гэж үнэлсэн. 2017 онд хоёр үнэлгээ, 2018 онд жил бүр тарьснаас хойш хоёр долоо хоногийн дараа дөрвөн уншлага хийсэн. sAUDPC (өвчний явцын муруйн доорх стандартчилагдсан талбай)-г өмнө нь тайлбарласны дагуу тооцоолсон.
Нийтэлсэн цаг: 2021 оны 4-р сарын 1