Ургамал ба эмгэг төрүүлэгч бодисууд
Иллинойсын Их Сургуулийн (одоо UC Davis-д байдаг) Доктор Пэт Браун шар буурцагны хөрвүүлэлтийн популяци (SCP) гэгддэг шар тарианы нийгэмлэгийн популяцийн зураглалыг гаргажээ.Энэ нь АНУ-ын орчинд ургамлын өсөлт хөгжилтийг хөнгөвчлөх зорилгоор гэрэл мэдрэмтгий бус, жижиг хэмжээтэй болж хувирсан олон төрлийн шугамын цуглуулга юм.Энэ судалгаанд энэ популяцийн 510 мөрийг ашигласан боловч муу соёололт болон чанарын хяналтын бусад асуудлаас болж бүх гурван шинж чанарыг шинжлэхэд бүх мөрийг ашиглаагүй.Эцэст нь 345 шугамын өгөгдлийг хитиний хариу урвал, 472 мөрийг flg22, 456 мөрийг TLS эсэргүүцлийн шинжилгээнд ашигласан.Б. күүкэйLSLP18 омгийг Арканзасын их сургуулийн доктор Берт Блюмээс авсан.
MAMP хариу хэмжих
Энэхүү судалгаанд flg22, (Genscript catalog# RP19986) болон chitin гэсэн хоёр өөр MAMP ашигласан.Хүлэмжинд хөрс (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) дүүргэсэн хавтгай дээр тавьсан оруулгад тарьсан.Ургамлыг цуглуулах өдөр навчны нэмэлт чийгээс зайлсхийхийн тулд дээж авахын өмнөх өдөр усалдаг.
Шугамуудыг санамсаргүй байдлаар сонгож, логистикийн шалтгаанаар 60 шугамаар багцалсан.Мөр бүрт хоёр үрээр гурван “сав” тарьсан.Өмнөх багцыг боловсруулангуут нийт хүн амыг үнэлэх хүртэл дараагийн багцуудыг тарьсан.Хоёр гүйлт бүрт генотипийг дахин санамсаргүй байдлаар хуваасан хоёр MAMP-ийн хувьд хоёр туршилтын гүйлт явуулсан.
ROS шинжилгээг өмнө нь тайлбарласны дагуу хийсэн.Товчхондоо, мөр бүрт зургаан үрийг 3 өөр саванд тарьсан.Үр суулгацаас гурвыг нь жигд байдалд үндэслэн сонгосон.Ер бусын харагддаг эсвэл олонхоос хамаагүй өндөр эсвэл богино суулгацыг ашиглаагүй.Гурван өөр 15 хоногийн настай сорго ургамлын 4-р навчны хамгийн өргөн хэсгээс 3 мм-ийн диаметртэй дөрвөн навчны дискийг тайрч авав.Хоёр ургамлын навч тутамд нэг диск, нэг ургамлын хоёр диск, хоёр дахь диск нь усны хяналт болдог (доороос харна уу).Дискүүдийг тус тусад нь 50 мкл H20 дээр 96 нүхтэй хар хавтан дээр байрлуулж, гэрэлд өртөхгүйн тулд хөнгөн цагаан битүүмжлэлээр битүүмжлэн, тасалгааны температурт хоносон.Маргааш өглөө нь урвалын уусмалыг 2 мг/мл химилюминесцент L-012 (Wako, каталог № 120-04891), 2 мг/мл тунхууны хэт исэл (VI-A төрөл, Sigma-Aldrich, каталог # P6782) ашиглан хийсэн. 100 мг/мл хитин буюу 2 мкМ Flg22.Энэ урвалын уусмалаас 50 мкл дөрвөн цооногийн гуравт нэмсэн.Дөрөв дэх худаг нь хуурамч хяналт байсан бөгөөд үүнд MAMP-аас бусад урвалын уусмалыг нэмсэн.Зөвхөн ус агуулсан дөрвөн хоосон худгийг хавтан бүрт оруулсан болно.
Урвалын уусмал нэмсний дараа гэрэлтэлтийг SynergyTM 2 олон илрүүлэлттэй микроплит уншигч (BioTek) ашиглан 2 минут тутамд 1 цагийн турш хэмжсэн.Хавтан уншигч нь энэ 1 цагийн турш 2 минут тутамд гэрэлтэлтийн хэмжилт хийдэг.Бүх 31 уншилтын нийлбэрийг тооцоолж, худаг бүрийн утгыг гаргасан.Генотип тус бүрийн MAMP-ийн хариу урвалын тооцоолсон утгыг (туршилтын гурван цооногийн дундаж гэрэлтэлтийн утга-худгийн хуурамч утга) - хоосон худгийн дундаж утгыг хасч тооцсон.Хоосон худгийн утгууд байнга тэгтэй ойролцоо байв.
Навчны дискүүдНикотиана бентамиана, чанарын хяналтын зорилгоор 96 цооногийн хавтан тус бүрт өндөр мэдрэмжтэй соргогийн нэг шугам (SC0003), бага хариу үйлдэлтэй соргогийн нэг шугам (PI 6069)-ийг мөн хяналт болгон оруулсан.
Б. күүкэйтариа бэлтгэх, тарих
Б. күүкэйТарилтыг өмнө нь тайлбарласны дагуу бэлтгэсэн.Товчхондоо, сорго үр тариаг гурван өдрийн турш усанд дэвтээж, зайлж, 1 литр конус колбонд хийж, 15psi, 121 ° C температурт нэг цагийн турш автоклавт хадгална.Дараа нь үр тарианы шинэ өсгөвөрөөс 5 мл орчим мацерат мицелигээр тарьсанБ. күүкэйLSLP18-ийг тусгаарлаж, өрөөний температурт 2 долоо хоног байлгаж, колбуудыг 3 өдөр тутамд сэгсэрнэ.2 долоо хоногийн дараа мөөгөнцөрт өртсөн сорго үр тариаг агаарт хатааж, дараа нь тариалалт хийх хүртэл 4 ° C-т хадгална.Туршилтын туршид ижил тарилга хэрэглэж, жил бүр шинэхэн болгосон.Тарилт хийхийн тулд 4-5 долоо хоногтой шар буурцагны ургамлуудад халдвартай 6-10 үр тариа суулгасан.Эдгээр мөөгөнцөрөөс үүссэн спорууд долоо хоногийн дотор залуу сорго ургамалд халдварыг эхлүүлсэн.
Үр бэлтгэх
Талбайд тариалахын өмнө үрийг фунгицид, шавьж устгах бодис, аюулгүй байдлын хольцоор эмчилсэн бөгөөд ~ 1% Spirato 480 FS фунгицид, 4% Sebring 480 FS фунгицид, 3% Sorpro 940 ES үрийн хамгаалалттай.Дараа нь үрийг 3 өдрийн турш агаарт хатааж, үрийн эргэн тойронд энэ хольцыг нимгэн бүрхсэн.Аюулгүйчлэгч нь Dual Magnum гербицидийг үүсэхээс өмнөх эмчилгээ болгон ашиглахыг зөвшөөрсөн.
Зорилтот навчны толбоны эсэргүүцлийн үнэлгээ
SCP-ийг 2017 оны 6-р сарын 14-15, 2018 оны 6-р сарын 20-ны өдрүүдэд АНУ-ын Клэйтон дахь Төв Тариалангийн судалгааны станцад хоёр туршилтын давталттайгаар санамсаргүй байдлаар иж бүрэн блокоор тарьсан.Туршилтыг нэг талбайд 10 үрээр 0,9 м эгнээ өргөнтэй 1,8 м дан эгнээнд суулгасан.Туршилт бүрийн захад ирмэгийн нөлөөллөөс урьдчилан сэргийлэхийн тулд хоёр хилийн эгнээ тарьсан.Туршилтыг 2017 оны 7-р сарын 20, 2018 оны 7-р сарын 20-ны өдрүүдэд тарьсан бөгөөд энэ үед сорго ургамал ургалтын 3-р шатанд байна. Өвчний шинж тэмдэг илрээгүй ургамлыг есөн, бүрэн гүйцэд гэж нэгээс есөн шатлалаар үнэлсэн. үхсэн ургамлуудыг нэг гэж тооцсон.Жил бүр тарилга хийснээс хойш хоёр долоо хоногийн дараа 2017 онд хоёр, 2018 онд дөрвөн удаа үнэлгээ авсан.sAUDPC (өвчний даамжрах муруйн доорх стандартчилагдсан талбай) -ийг өмнө тайлбарласны дагуу тооцоолсон.
Шуудангийн цаг: 2021 оны 4-р сарын 01